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酶标板在使用过程中是有几步需要操作

发布时间:2021-11-03      点击次数:103
  酶标板在酶联免疫吸附试验中, 参与免疫学反应的抗原、抗体、标记抗体或抗原的纯度、浓度和比例;缓冲液种类、浓度和离子强度、pH值和反应温度、时间等条件起着关键作用。此外,作为载体的固相聚苯乙烯表面对抗原、抗体或抗原抗体复合物的吸附也起着重要作用。
  酶标板是酶联免疫反应实验中的重要载体工具,分为可拆和不可拆的,一般用的较多的是可拆的酶标板。在使用时,按照以下步骤操作:
  1、加样品:将标本稀释液加到包被板内,将需要检测的血清用PBS或生理盐水按照1:20的比例稀释后取10ul加入到酶标板的反应孔内。
  2、加对照:加入阴性对照3孔,阳性对照1孔,还有100ul的对照血清。
  3、进行温育:将反应板震荡,使样品充分的混匀,置于37℃的温箱或者水浴反应20分钟的时间。
  4、洗板:用蒸馏水将洗涤液15ml稀释至300ml的体积。手洗的时候应该将反应板孔内的容物倾出,将洗涤液注满反应孔的位置,然后放置30秒钟后用力甩去,这样的动作重复5次后开始拍干。机洗需要进行5次,每孔注入洗涤液200ul或者可以注满,然后停留30秒钟后吸尽拍干。
  5、加酶标工作液:在每孔内加入100ul的酶标工作液,放置到37℃的温箱中,反应20分钟后洗板5次,洗板的操作和上述步骤4是相同的。
  6、这是反应的最后一步,就是显色和终止反应:将底物50ul加到反应孔内,37℃条件下避光显色10分钟的时间。在每孔内加入终止液50ul混匀用以终止反应。
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